As histórias são contadas através das divertidas piadas de Fey e também traz no elenco Alec Baldwin como Jack Donaghy, o precipitado novo executivo do canal que virou de cabeça para baixo o programa de Liz com suas intromissões.

A solteira Liz está vivendo o sonho que qualquer roteirista de comédia - ser o redator chefe de um programa ao vivo de Nova York. Sua vida é bagunçada quando Donaghy interfere em seu programa e força Liz a convencer Tracy Jordan — um louco e imprevisível astro do cinema - a se unir ao elenco. Agora Liz terá que controlar o incontrolável para que seu programa — e o seu sonho — continuem.

Na 3ª temporada, Jack (Kiefer Sutherland), que era o responsável por uma unidade de operações especiais em campo da Unidade Anti-Terrorista, teve que impedir um ataque terrorista de um letal vírus que poderia matar milhares de pessoas.

A nova temporada começa 18 meses depois. A CTU agora é chefiada por Erin Driscoll (Alberta Watson, "La Femme Nikita"), uma rígida agente do governo cuja principal prioridade em seu primeiro dia de trabalho foi demitir Jack.

Após a explosão de um trem de passageiros, Jack, que agora está trabalhando para o Secretário da Defesa James Heller (William Devane) e também está romanticamente envolvido com a filha casada dele, Audrey (Kim Raver, "Third Watch"), repentinamente se vê de volta à CTU para uma reunião com Driscoll, sob as ordens de Heller.

No elenco da nova temporada também estão Nestor Serrano ("O Dia Depois de Amanhã") como Navi Araz, um empresário do meio-oriente; a atriz indicada ao Oscar Shohreh Aghdashloo ("Casa de Areia e Névoa"), como sua esposa Dina; e Jonathan Ahdout como o filho deles, Behrooz. Já entre as novas funcionárias da CTU estão Lana Parrilla ("Boomtown") como Sarah Gavin; e Aisha Tyler ("CSI", "Friends"), como Marianne Taylor, uma analista de sistemas; além do retorno de Chloe O'Brien (Mary Lynn Rajskub).